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即刻打开mRNA高效纯化新思路!尊龙凯时-人生就是博,让你轻松搞定复杂过程。

发布时间:2025-03-21   信息来源:尊龙凯时官方编辑

无需纯化设备及低温设施,操作简单,节约设备和人力成本。

即刻打开mRNA高效纯化新思路!尊龙凯时-人生就是博,让你轻松搞定复杂过程。

背景概述

mRNA技术是一种新兴的平台技术,广泛应用于预防性疫苗、治疗性疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗、蛋白替代、基因编辑等领域。在体外转录合成mRNA的过程中,除了产生所需的mRNA产物外,还会生成反应酶(如T7 RNA聚合酶和无机焦磷酸酶)、NTP、DNA模板、盐离子及副产物(如dsRNA和截断RNA片段)等杂质。这些杂质可能对mRNA的定量、蛋白翻译效率和免疫原性产生负面影响。因此,体外转录后对目标mRNA进行纯化,以提高其纯度和完整性,确保产品的安全性和有效性是非常重要的。

常规mRNA纯化方法

常见的mRNA纯化方式包括氯化锂(LiCl)沉淀、磁珠纯化、硫酸铵沉淀及亲和层析纯化等。沉淀法和磁珠法操作相对简单快捷,但适合小规模应用,通常用于早期研发。在工业生产中,层析纯化是主要的方法,但需要专业的设备和条件。

轻量级mRNA亲和层析纯化试剂盒

尊龙凯时推出的轻量级mRNA亲和层析纯化试剂盒,无需专业设备,操作简便,样本纯化只需30分钟,且能产生高纯度、低NTP残留的目标产物。经过纯化后的mRNA可以直接用于多种下游实验,适应性强,确保高质量。

方法特点

相较于传统方法,尊龙凯时的亲和层析产品适合不同起始量的RNA样品,能够无设备配置和低温条件下进行纯化,大幅节约设备和人力成本。纯化后获得的mRNA不仅完整度高,且NTP去除效果明显,操作时间短,满足各种实验需求。

各种纯化方法流程介绍

1. 氯化锂沉淀法

该方法利用锂离子在特定pH下减少RNA分子间同电性相斥,提高RNA聚集能力。操作过程中,反应后的IVT产物加入LiCl溶液,-20°C放置后离心,得到RNA沉淀,后续使用RNase-free H2O重悬。

2. 磁珠纯化法

此法通过Oligo(dT)或羧基磁珠特异性结合带有Poly(A)尾的mRNA,以在磁力作用下分离目标RNA。操作步骤包括将反应后的IVT产物与磁珠混合、设定孵育后清除上清液,最后再用RNase-free H2O重悬。

3. 硫酸铵沉淀法

通过硫酸铵的沉淀特性,选择性去除杂质,能够实现高纯度的mRNA提取。将mRNA与适量的硫酸铵溶液混合后,进行离心操作,得到的沉淀再用RNase-free H2O溶解。

4. 亲和层析法

亲和层析主要利用Oligo(dT)柱在高盐条件下与mRNA的结合特性,利用电荷排斥原理高效洗脱mRNA。尊龙凯时的亲和层析试剂盒则简化了操作流程,极大地降低了对设备的依赖,使得mRNA纯化过程更为简便。

总结

尊龙凯时的轻量级mRNA亲和层析纯化试剂盒,不仅能有效提升纯化效率,还能使研究人员在无需复杂设备的情况下,快速获得高质量的mRNA产品,适合多样化的实验需求,充分满足生物医疗领域发展的需求。