本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。人白介素23(IL-23) ELISA试剂盒使用说明书如下:
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将预先包被adropin(AD)抗体的微孔中依次添加样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,使用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化作用下,TMB会转化为蓝色,最后在酸的作用下变为黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最终在450nm波长下用酶标仪测定其吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热元和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集血液后以3000转的速度离心10分钟,快速分离血清和红细胞。
2. 血浆:通过EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与足量生理盐水混合,进行捣碎处理,3000转离心10分钟后取得上清。
5. 保存:若样品未能及时检测,请分装为一次用量并在-20℃下冷冻存储,避免反复冻融;使用时应在室温下充分解冻,确保样品均匀。
自备物品及操作注意事项
本试剂盒的组成及标准品浓度(S0-S5):0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。
洗板方法及操作步骤
绘制标准曲线:在Excel中将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线,并按曲线方程计算各样本的浓度值。
试剂盒性能免责声明
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