尊龙凯时-人生就是博提供的人单核细胞白血病细胞THP-1是一种重要的细胞系，广泛应用于生物医学研究。这些细胞的生长特性为圆形、悬浮状态。在操作过程中，请注意以下培养与冻存条件。

冻存条件

冻存液应使用无血清冻存液，推荐的培养体系为1640培养基，添加10% FBS和0.05mM β-巯基乙醇，并附加1%的双抗。

传代方法

细胞传代时，建议以1:2的比例进行第一次传代。传代间隔为每2至3天换液一次。处理悬浮细胞时，请使用离心收集，切勿直接倾倒细胞培养液。

细胞培养注意事项

收到细胞后，请将其培养至健康状态，然后用完全培养液填满瓶口并密封。这是细胞运输的最佳方式。使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，并在超净工作台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态。显微镜下观察细胞生长情况，并摄影记录（建议不同倍数拍摄40x、100x及200x的图像），前三天的照片尤为重要，未提供照片将视为细胞状态良好。

细胞培养步骤

细胞传代： 如果未超过80%的汇合度，将培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，在37°C、5% CO2的条件下培养；如果细胞密度超过80%，可进行传代。传代细胞的具体步骤如下：

• 对于悬浮细胞： 方法一：在1000 RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清，加入1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2至1:5的比例分配到新的含有8ml培养基的皿中或瓶中。 方法二：可选择半数换液方式，弃去一半培养基后，将剩余细胞悬起，按1:2至1:3的比例分配至新的含有8ml培养基的皿中或瓶中。
• 细胞冻存： 细胞生长至培养瓶覆盖80%时，收集悬液于离心管并离心；弃上清后加入无血清冻存液混匀，放入冻存管中。将冻存的细胞置于-80℃冰箱存放超过24小时即可转移至液氮罐中。
• 细胞复苏： 从液氮中取出冻存管，快速置于37℃水浴中解冻，随后移至含5ml完全培养基的离心管中，并在1000 RPM下离心，重悬后接种至T25培养瓶，培养在37℃、5% CO2条件下。次日更换新鲜培养基继续培养。

售后服务说明

1）细胞出现的问题及重发条件： - 运输过程中细胞丢失、瓶身破损等情况将予以重发； - 收到后48小时内如有污染，请提供实验结果，核实后重发； - 收到后3天内拍照，出现问题未告知视为产品合格； - 细胞活性问题请于收到产品7天内提供实验结果，核实后重发。

2）不予重发的情况包括： - 客户造成的细胞污染或不当操作导致的细胞状态不佳； - 使用非本库推荐的细胞培养体系导致的问题； - 若未提供细胞培养前3天的照片，亦无法作为重发的依据。

尊龙凯时-人生就是博致力于为客户提供稳定的细胞培养解决方案，确保您的实验顺利进行，期待为您提供更好的服务。